(499) 519-32-49

Д-димер при диабете

Научная статья

Член-корреспондент НАН Украины Э. В. Луговской, Д. А. Ефимов, П. Г. Гриценко, И. Н. Колесникова, Н. Э. Луговская, Л. М. Литвинова, Е. П. Костюченко,

академик НАН Украины эндокринолог А. С. Ефимов, академик НАН Украины эндокринолог С. В. Комисаренко

Растворимый фибрин и D-димер как молекулярные маркеры сосудистых осложнений у больных сахарным диабетом

Показано, що при цукровому дгабетг 1 й 2 типу пгдвищуеться вмгст розничного фг-брину та D-димеру в плазмг кровг - найважливгших молекулярних маркергв активацгг системи зсгдання кровг. Збгльшення концентрацгг цих маркергв позитивно корелюе зг ступенем тяжкостг судинних ускладнень у хворих з цгею патологгею. В групг хворих з початковими функцгональними судинними ускладненнями виявлено достовгрне збгль­шення розчинного фгбрину в 5,5 раза, а D-димеру - в 2,1 раза в поргвняннг з контрольною групою здорових доноргв. У групг хворих з ускладненнями середньог тяжкостг розчинний фгбрин збгльшувався в 12,5 раза, а D-димер - в 3,0 раза. У групг з важкими ускладне­ннями розчинний фгбрин був збгльшений у 43,2 раза, а D-димер - в 6,6 раза. Таким чином, кглькгсний вмгст розчинного фгбрину та D-димеру в плазмг кровг е важливим дгагностичним показником судинних ускладнень при цукровому дгабетг.

Сахарный диабет - одна из главных проблем современной эндокринологии. В настоящее время нет достаточно эффективных методов диагностики сосудистых осложнений при са­харном диабете. Данные литературы свидетельствуют о том, что сахарный диабет сопро­вождается активационной системой свертывание крови и повышением риска сердечно-со­судистых заболеваний [1, 2]. Важнейшими молекулярными маркерами активации системы свертывания крови являются растворимый фибрин и D-димер, концентрационное соотно­шение которых в плазме крови имеет большое значение при диагностике угрозы тромбо-образования [3].

При активации системы свертывания крови образуется фермент тромбин, который прев­ращает фибриноген в фибрин дезАА, способный к спонтанной полимеризации. Вначале формируются растворимые комплексы фибрина с фибриногеном, а затем растворимые оли-гомеры фибрина различной длины, на концах которых находятся молекулы фибриноге­на [3]. Такие комплексы и олигомеры и представляют собой растворимый фибрин. Далее олигомеры удлиняются до протофибрил, которые после достижения критической длины латерально ассоциируют с образованием фибрилл. Последние ветвятся и в конечном счете формируют трехмерную сеть фибрина, которая является каркасом любого тромба. Па­раллельно с активацией фибриногена тромбин активирует фактор XIII, стабилизирующий фибрин путем формирования межмолекулярных ковалентных связей между периферичес­кими D-доменами соседних молекул [4]. Уже на уровне олигомеров растворимого фибрина происходит активация плазминогена до активного плазмина, который последовательно рас-

190 ISSN 1025-6415    Reports of the NaUonal Academy of Stiences of Пктагпе, 2009, №12

 

щепляет полимерный фибрин с образованием конечных продуктов Е-фрагмента и D-диме-ра [5].

В настоящее время очень мало данных о содержании растворимого фибрина и D-ди-мера в плазме крови при сахарном диабете. Увеличение их концентрации при указанной патологии показано в статьях [6, 7]. Нашей задачей было исследование количественного со­держания растворимого фибрина и D-димера в плазме крови больных сахарным диабетом 1 и 2 типов с сосудистыми осложнениями разной степени.

С этой целью было обследовано 59 больных сахарным диабетом 1 и 2 типов, которых распределили на три группы:

I группа состоит из 25 пациентов без осложнений или с функциональными обрати­мыми нарушениями в виде диабетических ангионейропатий. Это больные 1 типа сахарного диабета с длительностью заболевания не более 5-7 лет. В клинике из осложнений в основ­ном превалируют ангионейропатии нижних конечностей, без органической патологии со стороны почек и глаз и при отсутствии атеросклероза коронарных, церебральных или пе­риферических сосудов.

II группа - из 22 пациентов с осложнениями средней тяжести. Это больные преиму­щественно 2 типа сахарного диабета в возрасте 40 лет и старше с длительностью основного заболевания от 10 лет и более как с различными микроангиопатиями (ретинопатия и нефро-патия), так и с макроангиопатиями. Однако, в отличие от III группы больных с тяжелыми осложнениями, эти поражения с помощью лечения возможно компенсировать и стабили­зировать.

III группа - из 12 пациентов с тяжелыми осложнениями сахарного диабета 1 и 2 типов. Длительность диабета у всех обследованных пациентов превышает 15-20 и более лет. У всех без исключения пациентов выявлены тяжелые органические изменения сосудов. У большинства больных выявлена тяжелая ретинопатия со снижением или потерей зрения, нефропатия с гипертензией или почечной недостаточностью.

Контрольную группу составляли 18 здоровых доноров в возрасте 23-50 лет. Кровь для исследования (3 мл) брали из локтевой вены натощак. В качестве антикоагулян­та использовали 3,8% водный раствор цитрата натрия с контрикалом в концентрации 200 ед./мл. Кровь смешивали с антикоагулянтом в объемном соотношении 9:1 и сразу же центрифугировали при 1500 g в течение 10 мин. Полученную плазму помещали в пробирки и замораживали при -70 °С. Количественное определение растворимого фибрина и D-ди-мера в плазме крови проводили с помощью иммуноферментных методов, разработанных в Институте биохимии им. А. В. Палладина НАН Украины и описанных ранее [8, 9]. По­лученные результаты обрабатывали методом Вилкоксона-Манна-Уитни с использованием непараметрического критерия U [10].

Результаты исследований представлены в табл. 1. Было найдено, что уже в I группе пациентов с начальными функциональными сосудистыми осложнениями выявлено досто­верное увеличение концентрации растворимого фибрина в плазме крови в 5,5 раза по срав­нению с контрольной группой, а D-димера - в 2,1 раза. Еще более выраженные изменения наблюдались во II группе обследуемых с сосудистыми осложнениями средней тяжести: ра­створимый фибрин увеличивался в 12,5 раз по сравнению с контрольной группой, а D-ди-мер - в 3,0 раза. В III группе пациентов растворимый фибрин увеличен в 43,2 раза по сравнению с контрольной группой, а D-димер - в 6,6 раза.

Полученные нами результаты свидетельствуют о том, что при сахарном диабете 1 и 2 ти­пов происходит активация системы свертывания крови, которая проявляется в увеличении

ISSN 1025-6415    Доповгдг Нацгональног академгг наук Украгни, 2009, №12

 

 

Таблица 1. Средние значения концентрации растворимого фибрина и D-димера в плазме крови здоровых доноров и больных сахарным диабетом с разной степенью сосудистых осложнений

Группа те обследованных пациентов

Растворимый фибрин, мкг/мл

Ри

D-димер, нг/мл

Ри

Доноры, те=18

0,282

-

26,744

-

I, те=25

1,560

< 0,01

55,888

< 0,05

II, те=22

3,527

< 0,001

80,300

< 0,001

III, те=12

12,180

< 0,001

177,425

< 0,001

Примечание. Ри - сравнение с контрольной группой (доноры); непараметрический критерий U, исполь­зуемый в методе Вилкоксона-Манна-Уитни.

количественного содержания растворимого фибрина и D-димера в плазме крови. Повыше­ние концентрации молекулярных маркеров положительно коррелирует со степенью тяжести сосудистых осложнений у обследованных пациентов с данной патологией.

Таким образом, количественное содержание растворимого фибрина и D-димера в плаз­ме крови может быть важным диагностическим показателем сосудистых поражений при сахарном диабете, которые приводят к развитию сердечно-сосудистых заболеваний, ангио-нейропатий, ретинопатий, нефропатий и других осложнений [11].

1. Томашевська О. Я., Дзгсь 6.I., Фглгпюк А. Л. Особливост стану системи гемостазу у пащентав з метабол1чним синдромом // Кровооб1г та гемостаз. - 2006. - № 4. - С. 44-48.

2. Амосова Е.Н., Ткаченко Л. А., Клунник М. А. Диабет, преддиабет и сердечно-сосудистые заболе­вания: рекомендации Европейского общества кардиологов и Европейской ассоциации по изучению диабета // Серце i судини. - 2009. - № 1. - С. 27-47.

3. Луговской Э. В., Гриценко П. Г., Луговская Н. Э., Колесникова И. Н., Комисаренко С. В. Молекуляр­ный состав растворимого фибрина и продуктов расщепления фибрина. Методы их количественного определения // Трансфузиология и гематология. - 2006. - № 5. - С. 39-43.

4. Lorand L. Factor XIII: structure, activation, and interactions with fibrinogen and fibrin // Ann. N. Y. Acad. Sci. - 2001. - 936. - P. 291-311.

5. Gaffney P. J. Fibrin degradation products. A review of structures found in vitro and in vivo // Ibid. -

2001. - 936. - P. 594-610.

6. Nwose E. U., Richards R. S., Jelinek H.F., Kerr P. G. D-dimer identifies stages in the progression of diabetes mellitus from family history of diabetes to cardiovascular complications // Pathology. - 2007. -

39, No 2. - P. 252-257.

7. Tsianos E. B., Stathakis N. E. Soluble fibrin complexes and fibrinogen heterogeneity in diabetes mellitus // Thromb. Haemost. - 1980. - 44, No 3. - P. 130-134.

8. Луговской Э. В., Колесникова И. Н., Луговская Н. Э. и др. Растворимый фибрин и D-димер при нор­мально протекающей беременности и при угрозе ее прерывания // Укр. биохим. журн. - 2006. - 78,

№ 4. - С. 120-129.

9. Lugovskoy E. V., Gritsenko P. G., Kolesnikova I. N. et al. A neoantigenic determinant in coiled coil region of human fibrin /3-chain // Thromb. Res. - 2009. - 123, No 5. - P. 765-770.

10. Лапач С. Н., Чубенко А. В., Бабич П. Н. Статистические методы в медико-биологических исследова­ниях с использованием Excel. - Киев: Морион, 2001. - 408 с.

11. G‘фiмов Д. А. Вплив мжрохвильово! резонансно! терапп на гапкозильовання бшюв кровi хворих на дiабетичну нефропатю // Лжи Украши. - 2004. - 12, № 89. - С. 105-106.

Институт биохимии им. А. В. Палладина Поступило в редакцию 14.04.2009

НАН Украины, Киев

Институт эндокринологии и обмела веществ им. В. П. Комисаренко АМН Украины, эндокринолог Киев

 

ISSN 1025-6415    Reports of the National Academy of Sdences of иктг^, 2009, №12

 

Corresponding Member of the NAS of Ukraine E. V. Lugovskoy, D. A. Efimov, P. G. Gritsenko, I. N. Kolesnikova, N. E. Lugovskaya, L. M. Litvinova, E.P. Kostyuchenko, Academician of the NAS of Ukraine A. S. Efimov, Academician of the NAS of Ukraine S. V. Komisarenko

Soluble fibrin and D-dimer as molecular markers of blood vessels complications at diabetes mellitus

It has been shown that concentrations of soluble fibrin and D-drmer %‘ncrease rn blood plasma of patients wrth type 1 and 2 diabetes meltitus testifying to the activation of the blood coagulation system. The concentration increase of these molecular markers has positive correlation wrth the degree of blood vessels compUcations in patients suffering from diabetes meltitus. We have found that the soluble fibrin concentration increased 5.5 times and D-dimer - 2.1 times in the group of patients wrth initial functional blood vessel compUcations as compared to control group. In the group of patients wUh medium vessel compUcations, the soluble fibrin concentration was 12.5 times Mgher and D-dimer - 3.0 times Mgher. Soluble fibrin increased 43.2 times and D-dimer -6.6 times in the group of patients wUh the heavy blood heavy compUcations. Thus, soluble fibrin and D-dimer concentrations in blood plasma of patients suffering wUh diabetes meltitus are important diagnostic markers of blood heavy compUcations.

ISSN 1025-6415    Доповгдг Нацгональног академгг наук Украгни, 2009, №12